W losowaniu wezmą udział 64 kluby:

- 16 klubów PKO Ekstraklasy (w tym gronie Cracovia);
- 18 drużyn Fortuna 1 Ligi;
- 10 klubów II ligi (bez beniaminków i drużyn z miejsc 11-18 z sezonu 2018/2019);
- 4 zwycięzców rundy wstępnej (drużyny II ligi z miejsc 11-18 z sezonu 2018/2019 po rozegraniu 1 meczu);
- 16 zdobywców Pucharu Polski na szczeblu wojewódzkim w sezonie 2018/2019.

Gospodarzami meczów 1/32 finału Totolotek Pucharu Polski będą drużyny występujące w niższej klasie rozgrywkowej. W przypadku drużyn występujących w tej samej klasie rozgrywkowej, gospodarzami są drużyny, które podczas losowania danej pary zostały wylosowane jako pierwsze.

W sytuacji, gdy jedną parę utworzą drużyny PKO Ekstraklasy, z których jedna wywalczyła w ubiegłym sezonie awans do europejskich pucharów (w tym gronie również Pasy), gospodarzem meczu będzie drużyna uczestnicząca w tych rozgrywkach.